7-3
一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存1、真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。2、采血后室温静置1小时。3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。4、取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶...
6-14
玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中,要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用。1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1~2%的工业盐酸中数小时,使游离的碱性物质除去,再以流水冲净。对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有盐酸,数分钟后倾去盐酸,再以流水冲净,倒置于洗涤架...
5-30
出现问题出现问题的原因解决办法曲线OD值不正常试剂盒未回温试剂盒回温到25℃温度控制不好控制正确温度孵育时间不准确控制孵育时间洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干阳光直射,对着风直接吹避风避光酶标仪的波长错误酶标仪的波长450nm抗体的稀释错误正确的稀释抗体水质问题用矿泉水代替白板洗涤液配制错误正确的配制洗涤液少加液体(抗体、酶标记物、A液、B液)正确的步骤加液体错加液体无梯度标准品也污染换标准品点板OD值不正常控制温度时间在做一...
5-28
试剂,仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。一、标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进...
5-21
显色培养基模拟灌装应尽可能地模拟产品本身所经历的与设备接触的表面、容器密封系统、关键环节和关键工艺操作的接触,根据产品的生产工艺类型,确认无菌生产工艺的模拟灌装操作步骤,因冻干粉针剂无菌生产工艺是相对齐全的无菌生产工艺,下面以此为例,简介一下培养基模拟灌装试验的关注点。显色培养基模拟灌装试验主要应关注以下内容但不是全部,生产线的状态、试验的频率、培养基类型、灌装持续时间、灌装的数量、容器(西林瓶)体积、生产线速度、灌装体积、挑战性试验、培养、结果与评级、清场和清洗、模拟灌装中...
5-17
本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。然而,影响ELISA试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。ELISA试剂盒的操作方法双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲...
5-6
首先应明确,只有有证标准物质提供的认定值或标准值才能够用于校准、为其他物质赋值以及测量正确度确认,并通过其使用来声明测量结果的计量学溯源性。在我们的日常测量中,还会使用其它类型的标准物质,它们主要用于开展测量质量控制、测量精密度确认等。有时,在缺少有证标准物质的情况,也不得不使用这些标准物质来开展校准等活动,但是应进一步评估这些标准物质是否符合有证标准物质的特征,或溯源性和量值不确定度水平能够充分满足测量结果溯源性和准确度要求。有证标准物质的证书中,有时会提供一些额外的参考值...
4-24
请根据您需要称量的重量和容许误差选择合适的天平。如称量少于10mg的产品,建议使用十万分之一的分析天平。在购买产品时也请注意产品的重量能否满足您的需求。一般采用增量法或减量法进行称量,以下是一些建议供您参考:a.称量前:建议将产品直立放置一段时间,使产品全部集中至底部,便于取用。尤其是粘稠状物质,可以倾斜至与竖直方向呈45度,使产品集中在瓶底边缘。如果当心瓶盖上有粘附,可以在未打开瓶盖前甩动瓶身,使产品集中至瓶底。b.粉末或晶体:建议采用增量法称量,准备合适的干燥容器,归零后...
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